黄酮是一类在植物中广泛存在的次级代谢产物,具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性。而芦丁是黄酮类化合物中广泛存在的一种,也是国家药典中规定的标准品。
为了测定植物中黄酮的含量,常常以芦丁为标准品进行测定。具体操作步骤如下:
1.取适量植物样品,如茶叶、柚子皮等,研磨成粉末。
2.取适量芦丁标准品,称入容器中,加入一定量的甲醇,制成一定浓度的溶液。
3.取一定量植物样品粉末,加入一定量的甲醇,超声处理,制成一定浓度的提取液。
4.将步骤2和步骤3制成的溶液混合,过滤,取滤液进行进一步处理。
5.取一定量滤液,加入一定量的稀硫酸,进行酸水解。
6.酸水解后加入一定量的碳酸钠溶液,进行中和。
7.中和后,加入一定量的乙酸乙酯,进行萃取。
8.取乙酸乙酯层,进行干燥,得到黄酮类化合物的混合物。
9.将步骤8得到的混合物溶解,加入一定量的甲醇,制成一定浓度的溶液。
10.用高效液相色谱仪(HPLC)进行分析,测定其中芦丁含量,并计算出植物样品中黄酮类化合物的含量。
通过以上步骤,可以准确测定植物样品中黄酮含量,并以芦丁为标准品进行比较和分析。这一方法在食品、药品等领域中具有重要的应用价值。