2-巯基-1-甲基咪唑(MTT)是一种常用的细胞代谢活性指标试剂,其在细胞培养基中的浓度可以通过紫外吸光度法进行测定。本文将介绍MTT的紫外吸光度测定方法及其相关应用。
MTT的分子结构中含有咪唑环和巯基等官能团,可以通过氧化还原反应转化为紫色的甲基咪唑产物。在细胞培养实验中,MTT可被活细胞代谢酶还原为紫色产物,从而反映出细胞生长状态。MTT的浓度与细胞活性呈正相关关系,因此可以作为细胞增殖、存活和毒性等的指标。
MTT的紫外吸光度法测定是一种简单、快速、可靠的方法。在紫外光谱仪中,MTT产物在570nm处有最大吸收峰,根据其吸光度值可以计算出MTT的浓度。在实验操作中,将细胞培养物加入MTT试剂后,经过一定时间的培养和反应后,将细胞沉淀物离心,去除上清液,加入甲醇或异丙醇等溶解剂,使MTT完全溶解,再用紫外光谱仪测定其吸光度值。
MTT的紫外吸光度法在细胞生物学研究中有着广泛的应用。如在药物筛选中,可利用MTT测定药物对细胞生长的影响,评估其药效;在细胞毒性实验中,可通过MTT测定细胞存活率,评估毒性物质的危害程度。此外,MTT的紫外吸光度法还可用于细胞增殖实验、细胞凋亡实验等方面。
总之,MTT的紫外吸光度法是一种简便可靠的细胞活性测定方法,具有广泛的应用价值,对于细胞生物学研究有着重要的意义。